硅藻的樣品不能簡單使用甲醛或者其他試劑固定，時間久了色素退化或者硅質(zhì)殼被化學(xué)分解掉，本文收集了楊德廣、楊美臨、黃玥、李家英、劉俊琢等5位專家的硅藻制備方法，僅供大家選擇參考。
楊德廣.400年來吉林省二龍灣瑪珥湖硅藻組合變化及其生物多樣性.中國地質(zhì)大學(xué),2011.
?硅藻的制備方法
2009?年?6?月進(jìn)行了硅藻樣品的提取，實驗室工作流程如下：
1.溶液的配制方法
用?36%的鹽酸配制?10%的鹽酸的方法
（1）取?36%的濃鹽酸?150?ml
（2）取蒸餾水?350?ml
（3）將濃鹽酸緩慢地加入?350?ml?的蒸餾水中，邊加入邊攪拌，配成?500?ml10%的鹽酸
2.硅藻的制備步驟
（1）目的：除去樣品中的有機(jī)質(zhì)和碳酸鈣
（2）方法：加?H2O2去除有機(jī)質(zhì)，加?HCl?去除?CaCO3
3.步驟
（1）加?H2O2?2ml,觀察反應(yīng)，防止溢出
（2）1?小時后再加?2?ml?H2O2,?觀察反應(yīng)，防止溢出
（3）1?小時后先加?1?滴?HCl，反應(yīng)平靜后再加?2?ml?H2O2
（4）1?小時后再加?2?ml?H2O2觀察
（5）1?小時后先加?1?滴?HCl，反應(yīng)平靜后再加?2?ml?H2O2
（6）靜置?24?小時
（7）用水清洗至中性，其過程是：
a?將試管中的溶液倒出，嚴(yán)防樣品流出
b?用去離子水將樣品完全沖開，靜置，將試管中的溶液再倒出，嚴(yán)防樣品流出
c?反復(fù)操作?b?步驟直至樣品中的溶液呈中性
4.注意：
（1）每次加入?H2O2不可超過?2?ml
（2）每次加入?HCl?不可超過?2?滴
（3）在實驗過程中，加入?H2O2和?HCl?時，觀察樣品反應(yīng)的劇烈程度，如果樣品反應(yīng)劇烈，滴入乙醇
5.2009?年?10?月將制備好的硅藻化石水樣制成玻片
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楊美臨.博斯騰湖多代用指標(biāo)（側(cè)重硅藻）記錄的全新世氣候變化模式.蘭州大學(xué),2008.
本研究中,鉆孔BSTC001的硅藻樣品基本按照間隔scm取樣,有效分析樣品(統(tǒng)計至少300valves)共計179個,并隨機(jī)選取其中20個樣品進(jìn)行重復(fù)性實驗,以求鑒定的準(zhǔn)確性”硅藻樣品的預(yù)處理和載片的制作均采用ECRC標(biāo)準(zhǔn)硅藻處理方法(Battarbee,1986)”實驗具體步驟如下:
取樣:稱取冷凍干燥后的沉積物樣品0.01司.059,放入15ml的離心試管中”
去除有機(jī)質(zhì):加入適量的30%的雙氧水(H2O2),輕輕搖動離心試管,使樣品完全與H20:接觸，而后進(jìn)行水浴(70度)加熱,直至有機(jī)質(zhì)被除掉后,將樣品離心,去除上清液”該步驟中需要注意:[l]加入的H2O:不易過多,應(yīng)低于5ml,以免在加熱過程中由于反應(yīng)過于劇烈而使樣品溢出;[2]水浴加熱過程中,需不時觀察樣品反應(yīng)的程度,以避免樣品混和液被完全蒸干;?[3]在離心過程中離心機(jī)的轉(zhuǎn)速不易過高,以免造成樣品中硅藻過度壓實而破碎,控制在1200轉(zhuǎn)/分鐘為宜,每次的操作時間為4分鐘。
去除鈣質(zhì)膠結(jié)物質(zhì):向離心后的樣品加入適量的15%的稀鹽酸(HCL),在水浴加熱中進(jìn)行直至反應(yīng)停止放出氣泡為止,樣品在室溫下靜置一夜”該步驟加入稀HCL不僅可去除鈣質(zhì)膠結(jié)化合物,還能去除以上步驟中剩余的雙氧水”
水洗離心:將去鈣后的樣品用蒸餾水清洗并離心3-4遍,直至洗至中性”
浮選:加入比重2.4留ml的碘氫酸重液,仔細(xì)攪拌5分鐘后離心,浮選二次,目的是去除其他無機(jī)物質(zhì)”該步驟主要用于處理含砂的粗顆粒沉積物”
透明處理，水洗離心:將上部浮選液倒入燒杯中,直接加入含有1%冰醋酸的蒸餾水沖稀并靜置一夜,隨后多次水洗離心至中性”如果是細(xì)顆粒湖相沉積物,則直接加入1-2滴稀氨水,最后定量成10ml的硅藻懸浮液用于制片”
封片:將處理好的樣品用微量移液管(注射器)取定量100閃滴于潔凈的蓋玻片上,待自然干燥后,滴一滴硅藻膠(Naphrax)封片,稍稍烘干即可”待硅藻膠完全干燥凝固后即完成硅藻永久載片,然后放于標(biāo)本盒中用于顯微鏡觀察”每個樣品制片2張”
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黃玥.末次冰期以來南海及日本海硅藻及其古環(huán)境變化.華東師范大學(xué),2009.
所有硅藻樣品的處理均依據(jù)Hansson(1984)方法進(jìn)行,主要處理步驟如下:
1)去鈣質(zhì),在裝有硅藻樣品的試管中加入濃度為10%-15%的稀鹽酸,待樣品與鹽酸初步反應(yīng)后攪拌均勻并靜置12一24h,然后用蒸餾水水洗3次;
2)去有機(jī)質(zhì),加入濃度為30%的雙氧水,待樣品與雙氧水初步反應(yīng)后置于恒溫水浴鍋中(70度)加熱1-2小時,其后將樣品從水浴鍋中取出,同樣用蒸餾水水洗3次;
3)制片,用玻棒將樣品均勻涂于載玻片上,滴上Naphrax膠(折射率dn=1.73),蓋上蓋玻片,然后在電熱板上加熱(150-200℃),待玻片冷卻后保存于樣品盒中
李家英.南海北部陸坡ODP1144站位第四紀(jì)硅藻及其古環(huán)境演變.地質(zhì)評論,2002.
硅藻分析樣品取自O(shè)DP1144站位,該站位位于南海東北部大陸坡上,水深2037m,孔深近800m。硅藻樣品分析集中在ODP1144站位(綜合剖面)180m以上沉積段,該段沉積物相當(dāng)均一,其巖性為半深海陸緣淤泥。目前鑒定完成了164個樣(不包括重樣19個)。硅藻樣品的處理主要根據(jù)Sehrader(1973)和Battarbee(1986)方法進(jìn)行:每個樣取2g烘干樣先用10%HCL去鈣,水洗后加人30%H2O2煮沸至沉積物呈灰白色,水洗凈后,用2.4重液浮選2次,洗凈集中浮選物,用Hyrax膠做定量制片,在100X油鏡下進(jìn)行屬種鑒定,在40x鏡下統(tǒng)計250一300個殼體(以鏡下觀察眼數(shù)為準(zhǔn)),作為豐度計算(SehraderandGersonde,1978)。在鑒定過程中,特別注意到劃分生物地層的標(biāo)志種和反映古環(huán)境特征的替代指標(biāo)種。
劉俊琢.青藏高原湖泊表層沉積物中硅藻分布特征及影響因素研究.2011.
硅藻樣品的處理卜要參照Battarbee(1986)等的方下去進(jìn)行:
(l)去除有機(jī)物質(zhì):每個樣品準(zhǔn)確稱取0.1g左右,放入試管中,加入5?ml?30%的雙氧水于70度條件下水浴加熱3-4h,氧化除去樣品中的有機(jī)物;
(2)去除鈣質(zhì)膠結(jié)化合物:在氧化過程結(jié)束后,加入適量10%的鹽酸去除鈣質(zhì)膠結(jié)化合物及上一步中殘留的雙氧水,冷卻,靜置12h;
(3)清洗!離心:將去除鈣質(zhì)膠結(jié)化合物的樣品用蒸餾水清洗并離心3一4次(1200r/min,8min),直至中性,傾去上清液;
(4)封片:將清洗至中性的硅藻樣品懸浮液定容至10ml,并準(zhǔn)確量取0.2ml均勻地涂在潔凈的蓋玻片上,自然晾干”待晾干后,滴一滴中性樹膠于載玻片中央,將蓋玻片翻轉(zhuǎn)放于樹膠上,封片,置于烘箱中130度烘干,待樹膠徹底干燥!冷卻凝固后即完成了硅藻永久載片,放于標(biāo)本盒中用于顯微鏡觀察,每個樣品制片2張。