當(dāng)前,傳統(tǒng)的微藻細(xì)胞學(xué)檢測方法主要包括:?MTT/WST法、免疫熒光檢測、質(zhì)譜分析、流式細(xì)胞術(shù)、高內(nèi)涵分析等,這些檢測形式多是終點檢測法,僅給實驗提供一個最終結(jié)果,無法實現(xiàn)全程微藻細(xì)胞動態(tài)信息采集;而且大部分需要標(biāo)記和破壞細(xì)胞。
然而,科技在進(jìn)步,技術(shù)在革新!隨著電子技術(shù)在生物學(xué)研究領(lǐng)域的拓展應(yīng)用,傳感器阻抗技術(shù)在微藻細(xì)胞分析中的應(yīng)用具有其特有的優(yōu)勢,使得目前的微藻細(xì)胞分析檢測技術(shù)正走向?qū)崟r無標(biāo)記全自動的發(fā)展時代!
什么是RTCA?
RTCA,即實時無標(biāo)記細(xì)胞分析技術(shù)。(Real Time Cellular Analysis,RTCA)
該技術(shù)采用特殊工藝,將微電子細(xì)胞傳感器芯片整合到表面適于微藻細(xì)胞貼附與生長的細(xì)胞檢測板的底部或細(xì)胞浸潤遷移板的微孔膜,用以構(gòu)建實時、動態(tài)、定量跟蹤微藻細(xì)胞形態(tài)和增殖分化等改變的細(xì)胞阻抗檢測傳感系統(tǒng)。當(dāng)貼壁生長在微電極表面的微藻細(xì)胞引起貼壁電極界面阻抗的改變時,這種改變與微藻細(xì)胞的實時功能狀態(tài)改變成相關(guān)性,通過實時動態(tài)的電極阻抗檢測可以獲得微藻細(xì)胞生理功能相關(guān)的生物信息,包括細(xì)胞生長、伸展、形態(tài)變化、浸潤及遷移、死亡和貼壁等。
RTCA檢測原理
RTCA應(yīng)用領(lǐng)域
(一)微藻細(xì)胞增殖檢測
(二)化合物及細(xì)胞因子介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用
(三)細(xì)胞遷移及浸潤檢測
(四)細(xì)胞質(zhì)量控制
(五)細(xì)胞粘附及伸展檢測
(六)受體介導(dǎo)的信號通路檢測
(七)細(xì)胞與細(xì)胞相互作用(共培養(yǎng))
(八)病毒介導(dǎo)的細(xì)胞病變(病毒CPE)檢測
(九)NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞殺傷作用檢測
(十)藥物篩選應(yīng)用
(十一)藥物心肌細(xì)胞毒性檢測
RTCA技術(shù)優(yōu)勢
1、無需標(biāo)記
(1)可以節(jié)約因標(biāo)記帶來的時間和花費(fèi)
(2)不改變研究對象的性狀,使研究過程更為簡便及實現(xiàn)自動化
(3)不需要知道明確的作用靶點,可實現(xiàn)多功能的檢測?
2、實時動態(tài)監(jiān)測
(1)高質(zhì)量、更多的信息量
(2)動態(tài)實時檢測及數(shù)據(jù)收集?
3、持續(xù)的細(xì)胞質(zhì)控
(1)保證實驗細(xì)胞質(zhì)量?
4、非創(chuàng)傷性的檢測
(1)更接近生理狀態(tài)
(2)檢測后的細(xì)胞還可用于其他的檢測方法?
5、準(zhǔn)確性高,可針對不同通量檢測