?微藻是水中微小的“綠色工廠”,研究它們需要先讓這些活潑的小生命“安靜”下來,固定在載玻片上,才能用顯微鏡觀察它們的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。這個過程就像給微藻拍一張清晰的“證件照”。以下是具體操作步驟和注意事項,簡單易懂,一起學起來!
一、主要操作步驟
1. 取樣——找到目標微藻
用干凈的采樣瓶(或試管)采集水樣,避免污染。如果是培養(yǎng)的微藻,可直接用移液槍吸取少量樣本。
2. 固定——讓微藻“定住不動”
根據(jù)微藻類型選擇固定劑(常用福爾馬林或盧戈氏碘液):
– 福爾馬林:1-4%濃度,每10毫升水樣加1-2滴,搖晃混勻。
– 盧戈氏碘液:直接滴入水樣至顏色變淺棕色(微藻被染色并固定)。
靜置10-30分鐘,讓微藻沉淀到容器底部。
3. 清洗——去除多余化學試劑
用吸管吸去上層液體,加入少量清水輕輕沖洗沉淀的微藻,重復2-3次(避免沖散樣本)。
4. 制片——把微藻“粘”在玻片上
– 用吸管吸取沉淀的微藻,滴1-2滴在載玻片中央。
– 蓋上蓋玻片(從一側(cè)緩慢放下,避免產(chǎn)生氣泡)。
– 若樣本太稀,可自然晾干幾秒后再蓋片。
5. 鏡檢——顯微鏡下的“微世界”
– 將載玻片放在顯微鏡載物臺上,先用低倍物鏡(如10×)找到目標區(qū)域。
– 切換高倍物鏡(如40×)觀察細節(jié),調(diào)節(jié)細準焦螺旋使圖像清晰。
– 拍照或記錄觀察到的微藻形態(tài)(如形狀、顏色、結(jié)構(gòu))。
二、注意事項——安全又高效
1. 安全第一!
– 福爾馬林、戊二醛等有刺激性,需戴手套和口罩,在通風處操作。
– 廢液勿直接倒入下水道,需收集后按實驗室規(guī)范處理。
2. 固定時間別太久
– 福爾馬林固定超過1小時可能使細胞變形,及時清洗或觀察。
– 盧戈氏碘液染色后需盡快觀察,避免褪色。
3. 濃度要精準
– 固定劑濃度過高會破壞細胞,過低則固定不徹底。
– 新手建議先用低濃度(如1%福爾馬林),逐步調(diào)整。
4. 樣本別太密或太稀
– 微藻密度過高時,可用清水稀釋;過稀則需離心濃縮。
5. 蓋玻片要輕拿輕放
– 氣泡會影響觀察,蓋片時傾斜45°緩慢貼合液體。
6. 顯微鏡使用小技巧
– 高倍鏡下勿用粗準焦螺旋,避免壓碎玻片。
– 光線調(diào)至柔和(太亮會過曝,太暗看不清)。
三、為什么需要固定微藻?
微藻在水中會游動或漂浮,直接觀察可能模糊不清。固定后不僅能“定格”它們的形態(tài),還能殺死微生物,方便長期保存樣本。比如:
– 福爾馬林適合保存細胞結(jié)構(gòu);
– 盧戈氏碘液能同時染色淀粉等結(jié)構(gòu),讓細胞更清晰。
微藻固定鏡檢就像給這些“微觀小精靈”按下暫停鍵,幫助科學家看清它們的真面目。只需按步驟操作,注意安全細節(jié),你也能輕松探索水中的奇妙世界!如果第一次失敗,別氣餒——多練習幾次,就能拍出微藻的“完美證件照”啦!