光語(yǔ)帶你認(rèn)識(shí)微藻
第十篇——裸藻(Euglena)
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作者:俞建中(微信號(hào):Scophy117)
1.裸藻概述
裸藻門(mén)(Euglenophyta)下僅一個(gè)裸藻綱,下轄裸藻目和柄裸藻目,共四個(gè)科(裸藻科、變胞藻科、袋鞭藻科、柄裸藻科),約包含了40多個(gè)屬1000多個(gè)種,多數(shù)種類(lèi)為淡水種,通常大量的生存在平靜的內(nèi)陸水體,在池塘、水溝的表面形成綠色或者紅色的水華。
裸藻這個(gè)名字對(duì)大部分人來(lái)說(shuō)都很陌生,而實(shí)際上,裸藻門(mén)下的眼蟲(chóng)屬種如纖細(xì)裸藻(又名小眼蟲(chóng),Euglena ?gracils)作為生物學(xué)研究對(duì)象的歷史非常悠久,可以說(shuō)是目前研究最透徹的物種之一,列為實(shí)驗(yàn)生物學(xué)的模式種。
多數(shù)眼蟲(chóng)屬種類(lèi)的細(xì)胞長(zhǎng)度為幾十到幾百微米,具有光合作用的葉綠體,使的得它們具有光自養(yǎng)的能力(植物性),而同時(shí)也具有利用有機(jī)物(吸收可溶性有機(jī)物如氨基酸或直接吞噬有機(jī)物顆粒)進(jìn)行異養(yǎng)的能力(動(dòng)物性)。眼蟲(chóng)的葉綠體中含有葉綠素a和葉綠素b,眼蟲(chóng)的葉綠體有三層質(zhì)膜,而常見(jiàn)綠色陸地植物和綠藻類(lèi)的葉綠體為兩層膜。因此眼蟲(chóng)的葉綠體在生物進(jìn)化學(xué)中認(rèn)為來(lái)源于一個(gè)被吞噬的綠藻細(xì)胞,這一點(diǎn)觀點(diǎn)同時(shí)得到分子生物學(xué)研究技術(shù)的支持。眼蟲(chóng)葉綠體中含有淀粉核,為副淀粉(β-1,3葡聚糖)構(gòu)成,眼蟲(chóng)依靠此儲(chǔ)能物質(zhì)可以生存在無(wú)光的不利生存環(huán)境中,淀粉核是裸藻中屬的分類(lèi)特征之一(如淀粉核的數(shù)量、位置等),可用以區(qū)別不同的裸藻種類(lèi),如鱗孔藻屬(Lepocinclis)和扁裸藻屬(Phacus)。
所有的眼蟲(chóng)都有兩根鞭毛,位于細(xì)胞體的前端的一個(gè)小空穴(胞窩,reservoir)中,眼蟲(chóng)屬的一根鞭毛短,不能突出到空穴外,而另一根鞭毛非常長(zhǎng),光學(xué)顯微鏡下即可觀察到,在許多種中,這根長(zhǎng)鞭毛起到幫助細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的作用。
眼蟲(chóng)個(gè)體小而復(fù)雜,包含了諸多生存、生活和繁殖的機(jī)制,并為生物仿生學(xué)所關(guān)注,眼蟲(chóng)的特征有:靈活柔軟的外膜、在水中快速的運(yùn)動(dòng)(螺旋轉(zhuǎn)動(dòng))、一個(gè)能感光的蛋白晶體、利用脂囊泡和淀粉核儲(chǔ)能(且以副淀粉的方式而非淀粉)、除了用鞭毛進(jìn)行運(yùn)動(dòng)外還能扭動(dòng)細(xì)胞進(jìn)行運(yùn)動(dòng)、能利用太陽(yáng)能進(jìn)行光合自養(yǎng)也能直接利用有機(jī)物進(jìn)行異養(yǎng)、能跟植物一樣進(jìn)行光合作用但又沒(méi)有植物特有的纖維素質(zhì)細(xì)胞壁。
2.眼蟲(chóng)名字的起源
眼蟲(chóng)(Euglena)由德國(guó)自然學(xué)家Christian G. Ehrenberg (1795–1876)命名,1838年之前即已對(duì)其特征進(jìn)行了描述,“Euglena”這個(gè)詞由兩個(gè)希臘語(yǔ)詞“eu”和“glene”組成,意思分別是“好”與“眼球”,因在顯微鏡下明顯可見(jiàn)的眼點(diǎn)而得名,眼點(diǎn)為眼蟲(chóng)的感光器官。小眼蟲(chóng)(E. gracilis)的科學(xué)研究工作從1900年就已經(jīng)開(kāi)始了,Zumstein首先實(shí)現(xiàn)了這個(gè)物種的無(wú)菌培養(yǎng),并發(fā)表了研究報(bào)告。直到今天,多數(shù)研究依然在使用Zumstein所培養(yǎng)的株系,因此將這個(gè)藻株稱(chēng)為“Z”株系。
關(guān)于這個(gè)眼點(diǎn)多說(shuō)幾句,最初的科研最這個(gè)眼點(diǎn)眼點(diǎn)非常感興趣,做了些研究,探討視力發(fā)生的原初起源。眼點(diǎn)可以感光,并根據(jù)外界的光照強(qiáng)弱等因素,調(diào)整自身的運(yùn)動(dòng),太強(qiáng)了,就走開(kāi)點(diǎn),光弱了,就靠近光源去,所以池塘的裸藻藻華通常在早晨和傍晚出現(xiàn),中午的時(shí)候光照強(qiáng)就沉入到水深處。前陣某個(gè)電視臺(tái)的一個(gè)節(jié)目做了個(gè)很牛逼的事情,利用裸藻做了許多人臉出來(lái),其實(shí)用就是根據(jù)裸藻具有眼點(diǎn)的生物學(xué)特性,利用趨光性將藻細(xì)胞誘集到某個(gè)區(qū)域,形成了一幅幅人臉。(生物本能的利用可以做很多事情,比如你用肉包子擺一個(gè)心型,會(huì)引來(lái)一堆野狗幫你示愛(ài),用蜂蜜刷字倒是可能引來(lái)螞蟻寫(xiě)你的山盟海誓,當(dāng)然也可能被城管和掃地阿姨罵?。?/span>
3.眼蟲(chóng)的繁殖
老俞特意找了一個(gè)1926年的圖來(lái)說(shuō)明眼蟲(chóng)的繁殖(90年前?。。。巯x(chóng)以縱裂的方式進(jìn)行細(xì)胞復(fù)制,首先在母細(xì)胞內(nèi)講細(xì)胞核、鞭毛、液泡等細(xì)胞器復(fù)制一份,然后細(xì)胞從“頭部”開(kāi)始,分成兩半(葉綠體、細(xì)胞質(zhì)、淀粉核等也跟著分開(kāi)),每份都形成母細(xì)胞的一份拷貝。
4.微觀世界下的眼蟲(chóng)
在光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡的幫助下,我們能看到眼蟲(chóng)更為細(xì)致的一些細(xì)節(jié),以下展示一些圖,給大家一些感性認(rèn)識(shí)。
5.水環(huán)境中的眼蟲(chóng)
眼蟲(chóng)多數(shù)種類(lèi)生活在淡水中,因?yàn)榫哂欣糜袡C(jī)物的異養(yǎng)能力,常在湖泊河溝形成綠色水華,尤其是有機(jī)質(zhì)比較豐富的水域較為常見(jiàn),在水面形成一層綠色、血紅色或黃褐色的水膜,并隨外界的光照等情況變化而形成或散開(kāi)。水體中眼蟲(chóng)大量繁殖是水體肥沃的標(biāo)志。
根據(jù)報(bào)道,某些眼蟲(chóng)屬的種株能產(chǎn)毒,如Bertin等2009年觀察到血紅裸藻(E. Sanguinea)水華會(huì)引起池塘中魚(yú)類(lèi)死亡,發(fā)現(xiàn)該藻能產(chǎn)生一種有毒生物堿——裸藻素。Zimba等(2004)發(fā)現(xiàn)一株野生的血紅裸藻和一株德州大學(xué)保存的顆粒裸藻(E. Granulata,UTEX LB2345)具有生產(chǎn)神經(jīng)毒素——魚(yú)毒素(ichthyotoxin)的功能。(說(shuō)的好像是同一種毒素)
不過(guò)根據(jù)更多的研究報(bào)道和老俞的觀察,裸藻產(chǎn)毒的顯現(xiàn)還是比較少見(jiàn),水產(chǎn)養(yǎng)殖中池塘出現(xiàn)裸藻水色,往往被認(rèn)為是一種有益的藻華,藻體可為魚(yú)類(lèi)攝食。老俞以往工作過(guò)的幾個(gè)地方都看到池塘中出現(xiàn)大面積的血紅裸藻,厚厚的覆蓋了整個(gè)塘面,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)幾周到幾個(gè)月,而養(yǎng)殖的魚(yú)類(lèi)活的好好的,蝦也沒(méi)見(jiàn)死亡。同樣一些做赤潮藻研究的同行也發(fā)現(xiàn),環(huán)境中某些公認(rèn)有毒的藻種并沒(méi)有引起水生動(dòng)物中毒反應(yīng),同時(shí)某些野外產(chǎn)毒的藻株在人工培養(yǎng)條件下并未檢測(cè)到毒素,也就是說(shuō)藻類(lèi)產(chǎn)毒與其生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。因此對(duì)于眼蟲(chóng)水華要區(qū)別對(duì)待,不需要大驚小怪,看到藻就大呼有毒。
6.小眼蟲(chóng)的開(kāi)發(fā)應(yīng)用
近幾年微藻市場(chǎng)出現(xiàn)了一種名為“裸藻”的產(chǎn)品,并被開(kāi)發(fā)應(yīng)用為保健食品。這種藻即為小眼蟲(chóng)(纖細(xì)裸藻)。
小眼蟲(chóng)體型呈長(zhǎng)棒狀,寬度一般為10-20μm,長(zhǎng)度可達(dá)100μm,具有眼點(diǎn)一個(gè),對(duì)光照較為敏感(趨光性/避光性),小眼蟲(chóng)的體型也會(huì)隨著外界光照等情況改變,如在深夜會(huì)變成圓球狀。
小眼蟲(chóng)細(xì)胞中生物活性物質(zhì)種類(lèi)豐富,如β-胡蘿卜素,維生素C、維生素E、β-1,3-葡聚糖和PUFA等,并可作為單細(xì)胞蛋白的來(lái)源。含副淀粉的小眼蟲(chóng)干粉已經(jīng)通過(guò)美國(guó)FDA的GRAS認(rèn)證(GRN No. 513)。在中國(guó)也于2013年5月通過(guò)了小眼蟲(chóng)的新資源食品認(rèn)證。
在美國(guó)FDA文件中,著重指出了小眼蟲(chóng)中含有β-1,3-葡聚糖(副淀粉,paramylon)。β-1,3-葡聚糖是廣泛存在于植物、藻類(lèi)、細(xì)菌和真菌中的一種物質(zhì),尤其是在裸藻中,是主要的儲(chǔ)能物質(zhì),在小眼蟲(chóng)中可達(dá)到干重的60~70%。β-1,3-葡聚糖一直被認(rèn)為能起到免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)物質(zhì)的作用,對(duì)人體具有增強(qiáng)免疫的功效。研究還發(fā)現(xiàn),此物質(zhì)具有抗癌、抵抗細(xì)菌感染、激活巨噬細(xì)胞,誘導(dǎo)細(xì)胞因子分泌、促進(jìn)造血、抗輻射、治療燒傷、促進(jìn)傷口愈合、降血脂、抗氧化等作用,而其衍生物(如硫酸化)甚至具有抗HIV病毒的功效。
小眼蟲(chóng)在日本已經(jīng)開(kāi)發(fā)出一系列產(chǎn)品,并進(jìn)入了歐美和中國(guó)市場(chǎng)。常見(jiàn)的產(chǎn)品如下圖17,有膠囊、飲料、小食品、化妝品等類(lèi)型。
此處額外多扯幾句。作為曾經(jīng)的保健食品工作人員,對(duì)于目前健康品市場(chǎng)的混亂也是無(wú)可奈何,尤其是宣傳中的一些措辭,介紹笑話(huà)百出、配圖張冠李戴、原理牽強(qiáng)附會(huì)、功效夸大宣傳、所謂的應(yīng)用功效無(wú)科學(xué)依據(jù),就如裸藻這個(gè)產(chǎn)品,市面上已經(jīng)宣傳成包治百病,秒殺各種神藥了。老俞還是希望讓產(chǎn)品回歸真實(shí)、功效回歸科學(xué)、市場(chǎng)回歸理性。
忽略現(xiàn)有的過(guò)度宣傳,依據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)研究,小眼蟲(chóng)的特征及主要成分β-1,3-葡聚糖在增強(qiáng)免疫力方面具有相當(dāng)?shù)纳飳W(xué)功效,目前也是一個(gè)研究小熱點(diǎn),這將是小眼蟲(chóng)這個(gè)微藻新秀在未來(lái)市場(chǎng)開(kāi)發(fā)的主要方向之一。同時(shí)在法律法規(guī)方面,美國(guó)FDA的GRAS認(rèn)證及國(guó)內(nèi)的新資源認(rèn)證,也為小眼蟲(chóng)的市場(chǎng)化鋪平了道路??梢灶A(yù)見(jiàn)小眼蟲(chóng)將在幾年內(nèi)成為螺旋藻、小球藻、鹽藻、雨生紅球藻和束絲藻之外的第六個(gè)商業(yè)化的微藻品種。
另外日本科學(xué)家實(shí)現(xiàn)了利用裸藻中所含的副淀粉和脂肪酸合成了生物塑料,為小眼蟲(chóng)開(kāi)發(fā)應(yīng)用開(kāi)拓了新方向。
7.小眼蟲(chóng)的養(yǎng)殖生產(chǎn)
“裸藻”這個(gè)產(chǎn)品問(wèn)世的時(shí)候,有些朋友滿(mǎn)世界的找這個(gè)產(chǎn)品,發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)還沒(méi)有規(guī)?;a(chǎn),連這塊研究工作都很少人做,更有許多朋友打聽(tīng)怎么養(yǎng)殖生產(chǎn)。
為了滿(mǎn)足朋友們的要求,老俞去查了下小眼蟲(chóng)養(yǎng)殖的一些資料。
目前,世界僅見(jiàn)日本Euglena公司有規(guī)?;a(chǎn)此產(chǎn)品,可見(jiàn)的產(chǎn)品或原料均出自該公司。按檢索到的資料,2013年,日本沖繩石垣島的八重山公司(Yaeyama,大名鼎鼎的小球藻生產(chǎn)企業(yè))通過(guò)了該藻的ISO9001-HACCP認(rèn)證和猶太認(rèn)證,而Euglena公司主頁(yè)公示出來(lái)的生產(chǎn)基地也是位于石垣島,網(wǎng)站顯示的圖片是八重山公司的養(yǎng)殖場(chǎng),對(duì)外聲稱(chēng)該公司“裸藻”產(chǎn)品為光養(yǎng)生產(chǎn)。因此Euglena公司有可能是跟八重山公司合作,租用了其基地和生產(chǎn)資質(zhì)進(jìn)行生產(chǎn)。
而從科技文獻(xiàn)看,在上世紀(jì)六、七十年代小眼蟲(chóng)的規(guī)模養(yǎng)殖技術(shù)已經(jīng)研究的比較透徹,光自養(yǎng)、異養(yǎng)以及兼養(yǎng)(光養(yǎng)+異養(yǎng))的方式都有研究,之后也有相當(dāng)?shù)难芯酷槍?duì)富集維生素E、類(lèi)胡蘿卜素和多不飽和脂肪酸等物質(zhì)。此領(lǐng)域的研究工作,雖然少,其實(shí)國(guó)內(nèi)也有高手,深圳大學(xué)王江新老師在這塊領(lǐng)域做的相當(dāng)前沿。
想投資小眼蟲(chóng)生產(chǎn)尋求技術(shù)合作的人似乎還不少,對(duì)于這些朋友,老俞能給的建議是句老話(huà),前途是光明的,道路是曲折的。尤其是對(duì)于沒(méi)有技術(shù)、工程和市場(chǎng)基礎(chǔ),從頭開(kāi)始的項(xiàng)目來(lái)說(shuō),難度還是有不少的,解決問(wèn)題的過(guò)程中需要大把的金錢(qián)和時(shí)間。
首先,需要設(shè)定幾個(gè)指標(biāo),找到合適的藻種,食用安全性、生長(zhǎng)速度、目標(biāo)產(chǎn)物等(如副淀粉含量),這些基本指標(biāo)都需要考察;其次,設(shè)定養(yǎng)殖工藝路線(xiàn),光養(yǎng)還是異養(yǎng),或者先異養(yǎng)后光養(yǎng),選擇主要設(shè)施和設(shè)備類(lèi)型,當(dāng)然藻種和目標(biāo)品質(zhì)也需要跟工藝相互匹配,這些具體的問(wèn)題也要跟現(xiàn)有的資金、土地、生產(chǎn)環(huán)境相結(jié)合,例如土地資源、氣候條件、水電氣交通等等;其三,根據(jù)粗定工藝的各個(gè)節(jié)點(diǎn),重點(diǎn)關(guān)注產(chǎn)品安全性和品質(zhì)穩(wěn)定的問(wèn)題,關(guān)鍵設(shè)備和關(guān)鍵工藝環(huán)節(jié)依此而確定(這塊做過(guò)質(zhì)控的朋友會(huì)特別有體會(huì));其四,充分研究好相關(guān)的法律和行政條例,尤其是資質(zhì)方面的內(nèi)容,這塊工作的難度怎么高估都不是高估,項(xiàng)目運(yùn)作過(guò)程中,大部分的時(shí)間可能是要消耗在這里,漫長(zhǎng)的等待和煎熬是必然的;其五,終端產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)是必不可少的環(huán)節(jié),單純做原料最后都是死,提前進(jìn)行產(chǎn)品研發(fā)和市場(chǎng)鋪墊是項(xiàng)目長(zhǎng)期發(fā)展的基礎(chǔ)。
老俞接觸到的大部分人,也就考慮到養(yǎng)殖問(wèn)題,其實(shí)就整個(gè)項(xiàng)目來(lái)說(shuō),養(yǎng)殖生產(chǎn)這塊的資金投入或許是最大的,但難度真不是最大的。這塊內(nèi)容太大,在此不細(xì)述,朋友們有興趣,倒是可以私下慢慢探討。
8.血紅裸藻(E. sanguinea)
前面反復(fù)提到了血紅裸藻,老俞決定在本篇最后重點(diǎn)描述下這個(gè)眼蟲(chóng)屬的常見(jiàn)種。主要是因?yàn)槿绻尷嫌徇x擇一個(gè)新藻種將之市場(chǎng)化,血紅裸藻絕對(duì)是選擇重點(diǎn)。
血紅裸藻特點(diǎn)之一就是胞體顯示紅棕色,但是關(guān)于其色素分析的研究報(bào)告不多,M. Grung & S. Liaaen-Jensen?(1993)分析了一株血紅裸藻的色素成分,總類(lèi)胡蘿卜素的含量達(dá)到干重的0.7%,其中主要為蝦青素(占干重0.5%),其他還有β-胡蘿卜素、金盞花黃質(zhì)(adonixanthin),金盞花紅素(adonirubin)、硅藻黃素(diatoxanthin)、硅甲藻黃素(diadinoxanthin)、?綠藻黃素(loroxanthin)和痕量的新黃素(neoxanthin)。血紅裸藻細(xì)胞的顏色經(jīng)常有深淺變化,或黃、或棕、或褐紅等等不一而論,即使同一株系在不同時(shí)間也有色彩變化,因此推斷其中的類(lèi)胡蘿卜素也是多種多樣,何種色素占優(yōu)勢(shì)跟培養(yǎng)條件也有關(guān)系。在池塘中血紅裸藻的水華經(jīng)??梢?jiàn),其顏色也是紅棕黃不等,可見(jiàn)明顯的色差。
之所以說(shuō)血紅裸藻值得開(kāi)發(fā),理由有以下一些:第一,有賣(mài)相,健康產(chǎn)品的市場(chǎng)做的如何,跟長(zhǎng)相絕對(duì)有關(guān)系,就算沒(méi)有整容臉那種技術(shù)感,跟馬教主那樣有張藝術(shù)臉也是很賣(mài)座的;第二,有賣(mài)點(diǎn),副淀粉為一個(gè)主角,同時(shí)蝦青素領(lǐng)銜的類(lèi)胡蘿卜素,含量可觀種類(lèi)多,還有維生素E/C和PUFA等多個(gè)配角;第三,光養(yǎng)/異養(yǎng)均可,可利用原料來(lái)源豐富;第四,生產(chǎn)技術(shù)與工藝有一定門(mén)檻,規(guī)避山寨搗亂;第四,宏觀上講,為主糧與果蔬集合體,可分擔(dān)部分糧食供給安全的任務(wù)。
目前,血紅裸藻產(chǎn)業(yè)化的研究工作已經(jīng)有學(xué)者在進(jìn)行,泰國(guó)梅州大學(xué)對(duì)血紅裸藻進(jìn)行了一些養(yǎng)殖方面的研究,并檢測(cè)了其中的類(lèi)胡蘿卜素,正在進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的工作,同時(shí)梅州大學(xué)Srinuansom等開(kāi)始進(jìn)行將之應(yīng)用于錦鯉增色和紅羅非魚(yú)養(yǎng)殖的實(shí)驗(yàn)。國(guó)內(nèi)目前有開(kāi)始進(jìn)行小眼蟲(chóng)養(yǎng)殖的研究者們,既然都是眼蟲(chóng),有空捎帶著一起把這個(gè)種的研究也做了吧!
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